Sau khi bị thực tập các loại nó hành cho không ra hình người thì bạn Xuân quyết định tối nay tự kỷ với forum lớp.

Nguyên nhân chính là ở trên, còn nguyên nhân sâu xa đó là: một nhóm bạn của bạn Xuân vì không biết bài 8 làm như thế nào (cô mệt ~~> về sớm ~~> không ai hướng dẫn) nên không làm ra một cái khỉ gì hết, mà không làm được thì tương đương với việc hông có điểm.


Giáo viên:
Cô khá dễ, nói to, cho nên các bạn không phải lo lắng. Cái gì không biết thì cứ hỏi, cô sẽ giải thích.

Phần 15 phút đầu giờ:
Nội dung chính vẫn chỉ là xoay quanh giáo trình thực tập. Cứ đọc trong đó là có hết.

Phần nội dung:
Có 2 phần chính, phần 1 là ly trích sắc tố bằng dung môi, phần 2 là tách bằng sắc ký. Sau khi các bạn làm xong bài 15 phút thì sẽ được giảng về các bước thao tác của phần thực hành bài 8.

Phần 1:
- Nguyên liệu: 1-2g lá trong 15ml ethanol. Lưu ý không nên lấy quá nhiều.
- Lá: các bạn cân bằng cân điện tử. Khi cân nhớ cân gián tiếp thông qua một tờ giấy. (Nguyên tắc: không làm dơ mặt cân dẫn đến sai số). Khi cân nhớ ngắt bỏ cuống lá vì trong đó ít sắc tố. Ghi lại số liệu của lá.
- 15ml ethanol đo như thế nào thì mình quên rồi. Hình như là đo bằng ống đong ^^.

Tách xanthophyll:
- Nếu sắc tố chưa tách thì cho thêm một ít benzen hoặc cồn (đừng đọc giáo trình rồi cho benzene không, nó cũng chả tách đâu).

Thường thì các nhóm làm đều không tách ra hẳn, cho nên mọi người cứ cho thêm chất vào, làm cột dung dịch lên quá cao. Dung dịch của nhóm bạn Xuân cao tới 2/3 ống nghiệm lận, và cô nói "sai rồi em" . Nhóm làm đúng thì dung dịch của họ chỉ cao khoảng 1/4 ~ 1/3 ống nghiệm là hết đát.

- Kết quả cuối cùng sẽ có 2 lớp: Trên xanh, dưới vàng. Cô sẽ chấm kết quả trên ống nghiệm vì vậy không được đổ bỏ sau khi làm xong. Các bạn sẽ phải giải trích trong bài tường trình, ở trên chứa gì, ở dưới chứa gì.

Tách carotene:
- Khi cho KOH, lưu ý nên cho nhiều hơn so với trong giáo trình vài giọt. KOH sẽ tủa chlorophyll, nếu sau khi thao tác, dung dịch còn màu xanh tức là chưa tủa hết ~~> cho thêm KOH.
- Sau khi để yên nó sẽ tách thành hai lớp: trên vàng dưới xanh. Để lâu một chút thì sẽ có kết tủa trắng.
- Kết quả cuối cùng có 2 lớp: Trên vàng dưới xanh. Cũng như phần trên, các bạn không nên đổ bỏ kết quả. Và các bạn sẽ phải giải thích xem trong mỗi lớp chứa cái gì trong bài tường trình của các bạn. Cái tủa là cái gì, tại sao nó tủa. Tại sao nó tách lớp như thế, dựa vào cái gì mà những chất này tan vào lớp trên, trong khi những chất khác lại tan vào lớp dưới.

Phần 2: Sắc ký

- Bảng sắc ký cô sẽ phát cho các bạn. Nó là một bảng nhôm, trên bề mặt có lớp silicagel. Khi di chuyển, các bạn tuyệt đối không chạm tay vào mặt silicagel vì như thế sẽ làm hỏng giấy sắc ký. Có thể dùng kẹp gắp hoặc khăn giấy để di chuyển các bảng sắc ký.
- Giấy sắc ký được phát đầu giờ, cho nên các bạn phải bảo quản tốt, không để bị thấm những chất hóa chất trong quá trình thao tác phần 1.
- Mỗi nhóm chỉ có 1 bảng sắc ký vì vậy thao tác cần cẩn thận.

- Từ mép dưới giấy sắc ký, kẻ một đường bút chì ngang qua làm vạch chuẩn, cách mép 1.5cm. Lưu ý không để đầu bút chì chạm vào hai mép 2 bên của giấy sắc ký. Từ mép trên xuống 1cm, kẻ một đường nữa.

- Phần sắc ký, các bạn sẽ phải nghiền lại lá trong acetone. Công thức là 0.5~1g lá trong 15ml acetone. Ghi lại khối lượng lá đo được trong phần này.
- Dung dịch sắc ký trong giáo trình được thay lại thành: 15ml ether dầu hỏa + 5ml acetone.
- Khi chấm sắc ký, các bạn chấm trên đường bút chì, và chấm 5-7 lần (10 lần nếu muốn nó đậm). Để thật khô trước khi bỏ vào bình sắc ký.
- Khi sắc ký, nhớ canh me khi mực dung môi sắc ký chạy lên vạch bút chì trên thì phải lấy ra. Nếu để lâu thì kết quả không chính xác.
- Sắc ký đúng thì nó sẽ ra 4 vạch cơ bản nằm ngang song song với vạch bút chì. Tuy nhiên thực tế thực hành thì có thể có 6 vạch lận ^^. Nếu sắc ký chỉ ra 1 vạch nâu đen thui tức là đã làm sai rồi đó.

- Sau đó là đo Rf, ghi lại số liệu. Cô sẽ kêu các bạn cạo phần silicagel carotene màu vàng và chlorophyll A cho vào 2 becher khác nhau.
- Cuối cùng là màn đo phổ UV. Các bạn sẽ lấy mẫu dung dịch ly trích sắc tố đem lên chỗ cô để đo UV. Mình quên mất là mẫu sắc tố trong dung môi gì rồi. Sau khi đo xong, lấy số liệu về tính toán và viết báo cáo.

Bản tường trình: xem 2 câu hỏi phần cuối cùng của giáo trình.

Cái chót: Ở lại dọn vệ sinh ^^.

Lưu ý:

- Benzene rất độc, vì vậy nhóm sẽ được phát khẩu trang để bịt mặt.
- Không đổ hóa chất xuống cống mà phải đổ vào một cái bình gom gần bàn giáo viên.
- Nên giữ lại tất cả các dung dịch ly trích, các ống nghiệm đã tách sắc tố cho đến cuối giờ.

theo kinh nghiệm của mình thì ở TN 1 nếu không ra kết quả hoặc kết quả ko như mong muốn thì cứ thêm benzen vào, từng ít một thôi rồi lắc thật đều để clorophin tan vào trong benzen, chúng ta sẽ thấy phân lớp đẹp hơn.
còn TN 2 thì trước khi cho benzen vào thì các bạn phải cho KOH vào trước có thể cho nhìu hơn trong giáo trình hướng dẫn cũng được (kinh nghiệm của mình cho thấy thì phải thêm nhìu hơn) sau đó lắc thật đều----> bước này rất quan trọng. sau khi lắc xong rồi mới cho thêm benzen vào---> chắc chắn sẽ có kết quả. còn tại sao như vậy thì các bạn tự tim hỉu đi nha.. mình ko tiện nói ra ở đây (làm biếng ). Chúc các bạn thành công!

bồi thêm tấm hình nè:


bài bổ ích, like mạnh

7 vạch luôn, đẹp nhỉ.